正相色谱和反相色谱的区别及应用(正相色谱和反相色谱的相同点)

开心常识网 1572 2023-06-06 12:16:26

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1.正相和反相的区别主要是指填料(固定相)的区别。

2.正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强;反相色谱柱填料极性较弱,洗脱顺序由强到弱。

3.正相色谱用于正相色谱的固定相通常是二氧化硅和其他带有极性官能团如(NH2,APS)和氰基(CN,CPS)的键合相填料。

4.由于硅胶表面SiOH或其他极性基团的极性较强,所以分离顺序以样品中各组分的极性为准,即先将极性较弱的组分洗出色谱柱。

5.正相色谱中使用的流动相的极性相对低于固定相,如己烷、氯仿和二氯甲烷。

6,2,反相色谱反相色谱所用的填料通常以硅胶为基质,表面键合有极性官能团相对较弱的键合相。

7.反相色谱中使用的流动相是高极性的,通常是水、缓冲液、甲醇、乙腈等的混合物。

8.样品流出色谱柱的顺序是极性强的组分先被洗出,而极性弱的组分在色谱柱上会有更强的保留。

9.常用的反向填充剂有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(丁基)、C6H5(苯基)等。

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